DNase I (Rnase miễn phí) (2u/ul)
Mã số: HC4007B
DNase I là một endonuclease có thể tiêu hóa DNA chuỗi đơn hoặc chuỗi kép.Nó có thể thủy phân các liên kết phosphodiester để tạo ra mono-và oligodeoxynucleotide chứa nhóm 5'-phosphate và nhóm 3'-OH.Khoảng pH hoạt động tối ưu của DNase I là 7-8.Hoạt động của DNase I phụ thuộc vào Ca2+và có thể được kích hoạt bởi các ion kim loại hóa trị hai như CO2, Mn2+, Zn2+, v.v. Với sự có mặt của Mg2+, DNase Tôi có thể cắt ngẫu nhiên bất kỳ vị trí nào của DNA sợi đôi;Khi có mặt Mn2+, DNase I có thể cắt DNA mạch kép tại cùng một vị trí, tạo thành đầu cùn hoặc đầu dính có 1-2 nucleotide nhô ra.Nó có thể được sử dụng để xử lý các mẫu RNA khác nhau.
Các thành phần
Tên | 1KU | 5KU |
DNaseI tái tổ hợp (không có RNase) | 500 µL | 5 ×500 µL |
Bộ đệm phản ứng DNase I (10×) | 1mL | 5 × 1mL |
Điều kiện bảo quản
Sản phẩm này nên được bảo quản ở -25~-15oC trong 2 năm.Xin vui lòng tránh đóng băng-tan băng lặp đi lặp lại.
Hướng dẫn
Áp dụng cho việc loại bỏ DNA khỏi các mẫu RNA chỉ mang tính chất tham khảo.
1. Vui lòng sử dụng ống ly tâm và đầu pipet không chứa RNase để chuẩn bị hệ thống phản ứng sau:
Các thành phần | Khối lượng (μL) |
Bộ đệm phản ứng DNase I (10×) | 1 |
DNasel tái tổ hợp (không có RNase) | 1 |
ARN | X |
ddH không có RNase2O | Đến 10 |
2. Các điều kiện phản ứng như sau: 37oC, sau 15-30 phút, thêm nồng độ cuối cùng là dung dịch EDTA 2,5 mM và trộn đều, sau đó 65oC trong 10 phút.Mẫu đã xử lý có thể được sử dụng cho các thí nghiệm RT-PCR hoặc RT-qPCR tiếp theo, v.v.
Ghi chú
1. DNase l nhạy cảm với sự biến tính vật lý;Khi trộn nhẹ nhàng đảo ngược ống nghiệm vàlắc đều, không lắc mạnh.
2. Enzim phải được bảo quản trong hộp đá hoặc trên bồn nước đá khi sử dụng và phải bảo quản ở -20oC ngay sau khi sử dụng.
3. Sản phẩm này chỉ dành cho mục đích nghiên cứu.
4. Vui lòng sử dụng áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần để đảm bảo an toàn cho bạn.