RNA mang polyA
Mã số: HC4001A
Poly A, polyadenylate, là hỗn hợp của 100 ~ 10000 polyadenylate, được trùng hợp bởi polynucleotide phosphorylase trong ống nghiệm.In vivo, poly (a) được thêm vào đầu 3 của mRNA bằng enzyme để cải thiện tính ổn định của mRNA.Trong ứng dụng chiết xuất axit nucleic, việc thêm poly A vào dung dịch ly giải hoặc dung dịch liên kết có thể cải thiện hiệu suất DNA và RNA.Cơ chếcủa poly A cải thiện hiệu suất của axit nucleic như sau:
1. Tiếp xúc bão hòa với sự hấp phụ bề mặt của vật phẩm.Hầu hết các vật phẩm bằng polypropylen đều có tĩnh điện trên bề mặt, tĩnh điện sẽ hấp thụ axit nucleic.Carrier RNA có thể bão hòa những thứ nàytác dụng hấp phụ và làm giảm sự mất mát của axit nucleic mục tiêu.
2. Vô hiệu hóa các nuclease dạng vết: Có nhiều loại nuclease khác nhau trong các mẫu sinh học vàmôi trường.Poly A có thể làm bất hoạt các nuclease vết trong các bước chiết xuất hoặc bảo quản đểcải thiện năng suất và tính ổn định của axit nucleic mục tiêu.
3. Đồng kết tủa: Trong bước tinh chế axit nucleic của quá trình kết tủa hoặc liên kết qua trung gian rượu, poly A có thể kết tủa cùng với axit nucleic mục tiêu hoặc tạo thành các hạt polymer đểcải thiện khả năng phục hồi.
Điều kiện bảo quản
-20~8oC, bảo quản khô, bảo quản lâu dài nên đặt ở -20oC
Sự chỉ rõ
| Số CAS | 26763-19-9 |
| Vẻ bề ngoài | Bột đông khô màu trắng |
| độ tinh khiết | 99% |
| Trọng lượng phân tử | 700-3500 KDa |
Phương pháp sử dụng
Lấy một lượng bột đông khô thích hợp, thêm nước đã qua xử lý DEPC hoặc dung dịch muối guanidin vàohòa tan nó thành 0,1-1ug/uL, sau đó đóng gói lại và bảo quản ở -20°C.
Các ứng dụng
1. Chiết xuất DNA/RNA của virus: thêm 1-5ug Carrier RNA vào lysate có thể cải thiện năng suất RNA/DNA, ổn định axit nucleic mục tiêu và tránh sự xuống cấp của axit nucleic đã tinh khiết trong quá trình bảo quản.
2. Trong quá trình chiết xuất micro DNA/RNA bằng phương pháp màng cột (<1ug), việc thêm RNA mang vào 1-5ug sẽ có lợi cho việc cải thiện hiệu suất axit nucleic.
3. Trong bước cô đặc và kết tủa axit nucleic qua trung gian rượu, việc bổ sung RNA mang 1-2ug rất hữu ích để cải thiện khả năng phục hồi của RNA đoạn ngắn.
4. Trong dung dịch phản ứng PCR thăm dò định lượng, việc thêm RNA mang 10-100ng vào dung dịch phản ứng sẽ hữu ích để cải thiện độ nhạy và giảm CTgiá trị.
