2×PCR Master Mix (không có thuốc nhuộm)
PCR Master Mix là một loại dung dịch trộn sẵn PCR thông thường, sẵn sàng để sử dụng, bao gồm Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 và bộ đệm được tối ưu hóa.Trong quá trình phản ứng, chỉ có thể thêm mồi và mẫu để khuếch đại, giúp đơn giản hóa đáng kể các bước vận hành thí nghiệm.Sản phẩm này chứa chất ổn định tuyệt vời và có thể bảo quản trong 3 tháng ở 4oC.Sản phẩm PCR có phần nhô ra 3′-dA và có thể dễ dàng nhân bản vào vector T.
Điều kiện bảo quản
Sản phẩm nên được bảo quản ở -25oC ~ -15oC trong hai năm.
Thông số kỹ thuật
| Độ trung thực (so với Taq) | 1× |
| Bắt đầu nóng | No |
| nhô ra | 3′-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase |
| Định dạng phản ứng | SuperMix hoặc Master Mix |
| Tốc độ phản ứng | Tiêu chuẩn |
| Loại sản phẩm | Hỗn hợp PCR chính (2×) |
Hướng dẫn
1.Hệ thống phản ứng
| Các thành phần | Kích thước (μL) |
| DNA mẫu | Thích hợp |
| Sơn lót 1 (10 mol/L) | 2 |
| Sơn lót 2 (10 mol/L) | 2 |
| Hỗn hợp PCR tổng thể | 25 |
| ddH2O | Đến 50 |
2.Giao thức khuếch đại
| Các bước chu kỳ | Nhiệt độ (°C) | Thời gian | Chu kỳ |
| Tiền biến tính | 94oC | 5 phút | 1 |
| Biến tính | 94oC | 30 giây | 35 |
| Ủ | 50-60oC | 30 giây | |
| Sự mở rộng | 72oC | 30-60 giây/kb | |
| Gia hạn cuối cùng | 72oC | 10 phút | 1 |
Ghi chú:
1) Sử dụng mẫu: DNA bộ gen 50-200 ng;DNA plasmid 0,1- 10 ng.
2) Mg2+nồng độ: Sản phẩm này chứa 3 mM MgCl2 thích hợp cho hầu hết các phản ứng PCR.
3) Nhiệt độ ủ: Vui lòng tham khảo giá trị Tm lý thuyết của Sơn lót.Nhiệt độ ủ có thể được đặt thấp hơn 2-5oC so với giá trị lý thuyết của lớp sơn lót.
4) Thời gian gia hạn: Để nhận dạng phân tử, khuyến nghị là 30 giây/kb.Để nhân bản gen, 60giây/kb được khuyến nghị.
Ghi chú
1.Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và đeo găng tay dùng một lần khi vận hành.
2.Chỉ sử dụng cho nghiên cứu!
