Thuốc thử giải phóng mẫu
Thuốc thử giải phóng mẫu dành cho các tình huống chẩn đoán POCT phân tử.Đối với hai hệ thống LAMP khuếch đại trực tiếp và PCR khuếch đại trực tiếp, không cần chiết axit nucleic.Lysate thô của mẫu có thể được khuếch đại trực tiếp, gen mục tiêu có thể được phát hiện chính xác, thời gian phát hiện mẫu có thể được rút ngắn hơn nữa, hoàn toàn phù hợp với yêu cầu ứng dụng của POCT phân tử.Nó phù hợp cho gạc mũi, gạc họng và các loại mẫu khác.Các mẫu đã xử lý có thể được sử dụng trực tiếp để phát hiện PCR hoặc LAMP định lượng huỳnh quang theo thời gian thực và có thể đạt được kết quả tương tự như các phương pháp chiết thông thường mà không cần thao tác chiết axit nucleic phức tạp.
Điều kiện bảo quản
Vận chuyển và bảo quản ở nhiệt độ phòng.
Kiểm soát chất lượng
Phát hiện chức năng – qPCR định lượng: Hệ thống thuốc thử giải phóng mẫu 800μl được khuếch đại
với 1000 bản sao Novel Pseudovirus, một mẫu ngoáy mũi, dẫn đến đường cong khuếch đại tương tự vàGiá trị ΔCt trong phạm vi ± 0,5 Ct.
Quy trình thí nghiệmđộ phân giải
1. Lấy 800 µl Thuốc thử giải phóng mẫu và dàn đều dung dịch ly giải vào ống lấy mẫu 1,5 mL
2. Lấy tăm bông ngoáy mũi hoặc ngoáy họng bằng tăm bông;Quy trình lấy mẫu tăm bông mũi: lấy tăm bông vô trùng đưa vào lỗ mũi, từ từ đưa vào sâu khoảng 1,5 cm, xoay nhẹ 4 lần lên niêm mạc mũi trong hơn 15 giây , sau đó lặp lại thao tác tương tự trên khoang mũi còn lại với cùng một miếng gạc. Quy trình lấy mẫu gạc họng: lấy tăm bông vô trùng và nhẹ nhàng, lau nhanh amidan họng và thành sau họng 3 lần.
3.Đặt ngay miếng gạc vào ống lấy mẫu.Phải xoay đầu tăm bông và trộn trong dung dịch bảo quản trong ít nhất 30 giây để đảm bảo mẫu được rửa giải hoàn toàn trong ống lấy mẫu.
4. Ủ ở nhiệt độ phòng (20~25°C) trong 1 phút, quá trình chuẩn bị dung dịch đệm ly giải đã hoàn tất.
5. Cả hai hệ thống 25μl RT-PCR và RT-LAMP đều tương thích với lượng bổ sung mẫu 10μl cho các thí nghiệm phát hiện.
Ghi chú
1. Lượng lysate trực tiếp mẫu tối thiểu tương ứng với một miếng gạc có thể được điều chỉnh thành 400μl, có thể điều chỉnh theo nhu cầu xét nghiệm.
2. Sau khi mẫu được xử lý bằng thuốc thử giải phóng mẫu, nên tiến hành giai đoạn thử nghiệm tiếp theo càng sớm càng tốt, khoảng thời gian chờ đợi tốt nhất là dưới 1 giờ.
3. Độ pH của lysate mẫu có tính axit và hệ thống phát hiện cần phải có chất đệm nhất định.Nó phù hợp với hầu hết các phương pháp phát hiện huỳnh quang PCR, RT-PCR và LAMP với đệm pH, nhưng không phù hợp để phát hiện so màu LAMP không có đệm.
