Đầu dò RT-qPCR nhanh một bước Premix-UNG
Mã số: HCR5143A
Bộ thăm dò RT-qPCR một bước (FOR FAST) là bộ phát hiện nhanh RT-qPCR dựa trên đầu dò thích hợp cho PCR định lượng đơn hoặc đa bội sử dụng RNA làm mẫu (chẳng hạn như virus RNA).Sản phẩm này sử dụng Taq DNA Polymerase được biến đổi kháng thể thế hệ mới và Reverse Transcriptase chuyên dụng một bước, với bộ đệm được tối ưu hóa để khuếch đại nhanh, có tốc độ khuếch đại nhanh hơn, hiệu quả khuếch đại và độ đặc hiệu cao hơn.Nó hỗ trợ khuếch đại cân bằng ở cả mẫu đơn và ghép kênh của các mẫu có nồng độ thấp và cao trong thời gian ngắn.
Các thành phần
1. Bộ đệm 5×RT-qPCR (U+)
2. Hỗn hợp enzym (U+)
Ghi chú:
Một.Bộ đệm 5×RT-qPCR (U+)bao gồm dNTP và Mg2+;
b.Hỗn hợp enzyme (U+) bao gồm enzyme phiên mã ngược, Taq DNA polymerase khởi động nóng, chất ức chế RNase và UDG;
c.Sử dụng đầu tip, ống EP không có RNase, v.v.
Trước khi sử dụng, trộn kỹ bộ đệm 5×RT-qPCR (U+).Nếu có bất kỳ kết tủa nào sau khi rã đông, hãy đợi dung dịch đệm trở về nhiệt độ phòng, trộn và hòa tan, sau đó sử dụng bình thường.
Điều kiện bảo quản
Sản phẩm được vận chuyển cùng với đá khô và có thể bảo quản ở nhiệt độ -25~-15oC trong 1 năm.
Hướng dẫn
1. Phản ứng Hệ thống
| Các thành phần | Thể tích (20 µL sự phản ứng lại) |
| Bộ đệm 2 ×RT-qPCR | 4μL |
| Hỗn hợp enzym (U+) | 0,8μL |
| Sơn lót chuyển tiếp | 0,1 ~ 1,0μM |
| Sơn lót ngược | 0,1 ~ 1,0μM |
| thăm dò TaqMan | 0,05 ~ 0,25μM |
| Bản mẫu | X μL |
| Nước không có RNase | lên tới 25μL |
Lưu ý: Thể tích phản ứng là 10-50μL.
2. Giao thức đi xe đạp (Stiêu chuẩn)
| Xe đạp bước chân | Nhiệt độ. | Thời gian | Chu kỳ |
| Phiên mã ngược | 55oC | 10 phút | 1 |
| Biến tính ban đầu | 95oC | 30 giây | 1 |
| Biến tính | 95oC | 10 giây | 45 |
| Ủ/Mở rộng | 60oC | 30 giây |
| Giao thức đi xe đạp (Nhanh) Xe đạp bước chân |
Nhiệt độ. |
Thời gian |
Chu kỳ |
| Phiên mã ngược | 55oC | 5 phút | 1 |
| Biến tính ban đầu | 95oC | 5 giây | 1 |
| Biến tính | 95oC | 3 giây | 43 |
| Ủ/Mở rộng | 60oC | 10 giây |
Ghi chú:
Một.Nhiệt độ sao chép ngược nằm trong khoảng từ 50oC đến 60oC, việc tăng nhiệt độ giúp khuếch đại các cấu trúc phức tạp và các mẫu có hàm lượng CG cao;
b.Nhiệt độ ủ tối ưu cần được điều chỉnh dựa trên giá trị Tm của mồi và chọn thời gian thu tín hiệu huỳnh quang ngắn nhất dựa trên thiết bị Real Time PCR.
Ghi chú
Vui lòng mặc PPE cần thiết, chẳng hạn như áo khoác và găng tay phòng thí nghiệm, để đảm bảo sức khỏe và sự an toàn của bạn!
