2×PCR Super Mix (có thuốc nhuộm)
2× PCR Master Mix chứa Taq DNA Polymerase, dNTP và các thành phần cần PCR khác.Master Mix ổn định trong 3 tháng ở 4oC với các chất ổn định tùy chỉnh của chúng tôi.Dung dịch trộn trước được tối ưu hóa cho PCR thông thường và sẵn sàng sử dụng bằng cách thêm mẫu DNA và mồi.Sản phẩm PCR có thể được nạp trực tiếp để điện di bằng thuốc nhuộm xanh bromophenol được nạp sẵn.Các sản phẩm khuếch đại chứa phần nhô ra 3'-dA và có thể dễ dàng nhân bản vào vectơ T.2×PCR Master Mix đơn giản hóa quy trình PCR và giảm ô nhiễm.
Điều kiện bảo quản
Sản phẩm nên được bảo quản ở -25oC ~ -15oC trong 2 năm.
Thông số kỹ thuật
| Độ trung thực (so với Taq) | 1× |
| Bắt đầu nóng | No |
| nhô ra | 3'-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase |
| Định dạng phản ứng | SuperMix hoặc Master Mix |
| Tốc độ phản ứng | Tiêu chuẩn |
| Loại sản phẩm | Hỗn hợp PCR chính (2x) |
Hướng dẫn
1.Hệ thống phản ứng
| Các thành phần | Âm lượng(μL) |
| DNA mẫu | Thích hợp |
| Sơn lót 1 (10 mol/L) | 2 |
| Sơn lót 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Hỗn hợp PCR 2× | 25 |
| ddH2O | đến 50 |
2.Giao thức khuếch đại
| Các bước chu kỳ | Nhiệt độ (°C) | Thời gian | Chu kỳ |
| Biến tính ban đầu | 94 | 5 phút | 1 |
| Biến tính | 94 | 30 giây | 35 |
| Ủ | 50-60 | 30 giây | |
| Sự mở rộng | 72 | 30-60 giây/kb | |
| Phần mở rộng cuối cùng | 72 | 10 phút | 1 |
Ghi chú:
1) Sử dụng mẫu: DNA bộ gen 50-200ng;DNA plasmid 0,1-10ng.
2) Mg2+nồng độ: Sản phẩm này chứa 3mM MgCl2, phù hợp với hầu hết các phản ứng PCR.
3) Nhiệt độ ủ: Vui lòng tham khảo giá trị Tm lý thuyết của mồi.Nhiệt độ ủ có thể được đặt thấp hơn 2-5oC so với giá trị lý thuyết của lớp sơn lót.
4) Thời gian gia hạn: Để nhận dạng phân tử, khuyến nghị là 30 giây/kb.Để nhân bản gen, khuyến nghị là 60 giây/kb.
Ghi chú
1.Các sản phẩm PCR có 2× PCR Master Mix không phù hợp cho điện di trên gel polyacrylamide.
2.Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và đeo găng tay dùng một lần khi vận hành.
3.Nó chỉ được sử dụng cho mục đích nghiên cứu!
