Cấp độ siêu hạt nhân GMP
Mã số: HC2016A
Cấp độ UltraNuclease GMP được thể hiện và tinh chế trong Escherichia coli (E.coli) bằng công nghệ biến đổi gen và được điều chế trong môi trường GMP.Nó có thể làm giảm độ nhớt của chất nổi trên bề mặt tế bào và chất ly giải tế bào trong nghiên cứu khoa học, tăng hiệu quả tinh chế protein và tăng cường nghiên cứu chức năng protein.Sản phẩm này cũng có thể giảm dư lượng axit nucleic của vật chủ xuống mức pg, cải thiện hiệu suất và độ an toàn của các sản phẩm sinh học ứng dụng bao gồm tinh chế vi rút, sản xuất vắc xin và sản xuất dược phẩm protein/polysacarit.Ngoài ra, sản phẩm còn có thể ứng dụng để ngăn chặn sự kết tụ của các tế bào đơn nhân máu ngoại vi (PBMC) của con người trong liệu pháp tế bào và phát triển vắc xin.
UltraNuclease được cung cấp dưới dạng thuốc thử tiệt trùng, rửa giải trong dung dịch đệm (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), có dạng chất lỏng trong suốt, không màu.Sản phẩm này được sản xuất theo yêu cầu quy trình GMP và được cung cấp ở dạng lỏng.
Các thành phần
Loại UltraNuclear GMP (250 U/μL)
Điều kiện bảo quản
Sản phẩm được vận chuyển cùng với đá khô và có thể bảo quản ở -25°C~-15°C trong hai năm.
Nếu sản phẩm đã được mở và bảo quản ở nhiệt độ 4oC trong hơn một tuần, chúng tôi khuyên bạn nên lọcsản phẩm để ngăn ngừa ô nhiễm vi sinh vật.
Thông số kỹ thuật
| Máy chủ biểu thức | E. coli tái tổ hợp với gen UltraNuclease |
| Trọng lượng phân tử | 26,5 kDa |
| điểm điện thế | 6,85 |
| độ tinh khiết | ≥99% (TRANG SDS) |
| Bộ đệm lưu trữ | 20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
|
Định nghĩa đơn vị | Định nghĩa của một đơn vị Hoạt động (U) là lượng enzyme được sử dụng đểthay đổi giá trị hấp thụ của ΔA260 thêm 1,0 trong 30 phút ở mức 2,625 mLhệ thống phản ứng ở 37oC với độ pH là 8,0 (tương đương với quá trình tiêu hóa hoàn toàn37 μg DNA tinh trùng cá hồi thành oligonucleotide). |
Hướng dẫn
1. Mẫu Bộ sưu tập
Tế bào bám dính: loại bỏ môi trường, rửa tế bào bằng PBS và loại bỏ phần nổi phía trên.
Tế bào huyền phù: thu thập tế bào bằng cách ly tâm, rửa tế bào bằng PBS, ly tâm ở tốc độ 6.000vòng/phút trong 10 phút, thu thập cặn.
Escherichia coli: thu thập vi khuẩn bằng cách ly tâm, rửa một lần bằng PBS, ly tâm ở tốc độ 8.000vòng/phút trong 5 phút và thu cặn.
2. Xử lý mẫu
Xử lý các viên tế bào thu được bằng dung dịch đệm ly giải theo tỷ lệ khối lượng(g) trên thể tích (mL)1:(10-20), hoặc bằng phương pháp cơ học hoặc hóa học trên đá hoặc ở nhiệt độ phòng (1g viên tế bào chứa khoảng
109 ô).
3. Xử lý bằng enzym
Thêm 1-5mM MgCl vào hệ thống phản ứng và điều chỉnh độ pH đến 8-9.
Thêm UltraNuclease theo tỷ lệ 250 Units để tiêu hóa 1 g viên tế bào, ủ ở 37oC trong hơn 30 phút.Vui lòng tham khảo biểu mẫu “Thời gian phản ứng được đề xuất” để chọnthời gian điều trị.
4. Chất nổi trên bề mặt Bộ sưu tập
Ly tâm ở tốc độ 12.000 vòng/phút trong 30 phút và thu lấy phần nổi phía trên.
Lưu ý: Nếu dung dịch có tính axit hoặc kiềm hoặc chứa nồng độ muối, chất tẩy rửa hoặc chất tẩy rửa caochất khử chất, vui lòng tăng liều lượng enzyme hoặc kéo dài thời gian điều trị cho phù hợp.
Điều kiện phản ứng khuyến nghịtiện ích
| Tham số | Điều kiện tối ưu | Điều hòa hiệu quả |
| Mg2+Nồng độ | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Nhiệt độ | 37oC | 0-42oC |
| Nồng độ DTT | 0-100 mM | >0 mM |
| Nồng độ Mercaptoetanol | 0-100 mM | >0 mM |
| Nồng độ cation đơn trị | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Nồng độ photphat lớn | 0-10 mM | 0-100 mM |
Khuyến khích Sự phản ứng lại Thời gian (37oC, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Lượng UltraNuclease (Nồng độ cuối cùng) | Thời gian phản ứng |
| 0,25 U/mL | >10 giờ |
| 2,5 U/mL | >4 giờ |
| 25 U/mL | 30 phút |
Ghi chú:
Vui lòng mặc PPE cần thiết, chẳng hạn như áo khoác và găng tay phòng thí nghiệm, để đảm bảo sức khỏe và sự an toàn của bạn!
