Phosphatase kiềm (ALP)
Sự miêu tả
Alkaline Phosphatase có nguồn gốc từ chủng E. coli tái tổ hợp mang gen TAB5.Enzim này xúc tác quá trình khử phospho ở đầu 5' và 3' của các phosphomonoester DNA và RNA.Ngoài ra, nó thủy phân ribose, cũng như deoxyribonucleoside triphosphate (NTP và dNTP).TAB5 Alkaline Phosphatase tác động lên các đầu 5' nhô ra, 5' lõm và đầu cùn.Phosphatase có thể được sử dụng trong nhiều ứng dụng sinh học phân tử, chẳng hạn như nhân bản hoặc ghi nhãn đầu dò để loại bỏ các đầu bị phosphoryl hóa của DNA hoặc RNA.Trong các thí nghiệm nhân bản, quá trình khử phospho ngăn cản DNA plasmid được tuyến tính hóa khỏi khả năng tự thắt.Nó cũng có thể làm suy giảm các dNTP chưa hợp nhất trong các phản ứng PCR để chuẩn bị khuôn mẫu cho trình tự DNA.Enzim này bị bất hoạt hoàn toàn và không thể phục hồi khi đun nóng ở 70°C trong 5 phút, do đó việc loại bỏ phosphatase trước khi gắn hoặc dán nhãn kết thúc là không cần thiết.
Cách sử dụng
1.Alkaline phosphatase kết hợp với protein (kháng thể, streptavidin, v.v.) có thể xác định cụ thể các phân tử mục tiêu và có thể được sử dụng trong phát hiện ELISA, WB và mô hóa học;
2.Alkaline phosphatase có thể được sử dụng để khử phospho ở đầu 5' của DNA hoặc RNA để ngăn chặn sự tự liên kết;
3. DNA hoặc RNA khử phospho ở trên có thể được dán nhãn bằng phốt phát có nhãn phóng xạ (thông qua T4 poly-nucleotide kinase)
Cấu tạo hóa học
Sự chỉ rõ
Các bài kiểm tra | Thông số kỹ thuật |
Hoạt động enzyme | 5U/μL |
Hoạt động Endonuclease | Không được phát hiện |
Hoạt động Exonuclease | Không được phát hiện |
Hoạt động đặt biệt danh | Không được phát hiện |
Hoạt động RNase | Không được phát hiện |
DNA của vi khuẩn E.coli | 1 bản sao/5U |
nội độc tố | Thử nghiệm LAL, 10EU/mg |
độ tinh khiết | ≥95% |
Vận chuyển và lưu trữ
Vận tải:môi trường xung quanh
Kho :Bảo quản ở 2-8°C
Đề nghị kiểm tra lạiMạng sống:2 năm