siêu hạt nhân
UltraNuclease là một endonuclaese biến đổi gen có nguồn gốc từ Serratia marcescens, có khả năng phân hủy DNA hoặc RNA, sợi đôi hoặc sợi đơn, tuyến tính hoặc vòng trong nhiều điều kiện, phân hủy hoàn toàn axit nucleic thành oligonucleotide 5'-monophosphate với chiều dài 3-5 bazơ .Sau khi sửa đổi kỹ thuật di truyền, sản phẩm được lên men, biểu hiện và tinh chế bằng Escherichia coli (E. coli), giúp làm giảm độ nhớt của chất nổi trên bề mặt tế bào và chất ly giải tế bào trong nghiên cứu khoa học, đồng thời cải thiện hiệu quả tinh chế và nghiên cứu chức năng của protein.Nó cũng có thể được sử dụng trong liệu pháp gen, tinh chế virus, sản xuất vắc xin, công nghiệp dược phẩm protein và polysacarit làm thuốc thử loại bỏ axit nucleic còn sót lại của vật chủ.
Tính năng sản phẩm
| Số CAS | 9025-65-4 |
| Số EC | |
| Trọng lượng phân tử | 30kDa |
| Điểm đẳng điện | 6,85 |
| Độ tinh khiết của protein | ≥99%（ SDS-PAGE & SEC-HPLC） |
| Hoạt động cụ thể | ≥1.1×106U/mg |
| Nhiệt độ tối ưu | 37°C |
| pH tối ưu | 8,0 |
| Hoạt động protease | tiêu cực |
| gánh nặng sinh học | ＜10CFU/100.000U |
| Protein tế bào chủ còn sót lại | 10ppm |
| Kim loại nặng | 10ppm |
| Nội độc tố vi khuẩn | ＜0,25EU/1000U |
| Bộ đệm lưu trữ | 20mM Tris-HCl, pH 8,0, 2mM MgCl2 , 20mM NaCl, 50% Glycerol |
Điều kiện bảo quản
Vận chuyển ≤0°C；-25~-15°C Bảo quản, hiệu lực 2 năm (tránh đóng băng-tan băng).
Định nghĩa đơn vị
Lượng enzyme được sử dụng để thay đổi giá trị hấp thụ △A260 thêm 1,0 trong vòng 30 phút ở 37 °C, pH 8,0, tương đương với 37μg DNA tinh trùng cá hồi được tiêu hóa bằng cách cắt thành oligonucleotide, được xác định là đơn vị hoạt động (U).
Kiểm soát chất lượng
Protein tế bào chủ còn sót lại: Bộ xét nghiệm ELISA
•Protease Dư lượng: 250KU/mL UltraNuclease phản ứng với chất nền trong 60 phút, không phát hiện thấy hoạt động nào.
•Nội độc tố vi khuẩn: LAL-Test, Dược điển của Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa Tập 4 (Phiên bản 2020) phương pháp thử nghiệm giới hạn gel.Nội quy chung (1143).
•Gánh nặng sinh học: Dược điển của Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa Tập 4 (Ấn bản 2020)— Tổng quát
Quy tắc kiểm tra độ vô trùng (1101), Tiêu chuẩn quốc gia PRC, GB 4789.2-2016.
•Kim loại nặng:ICP-AES, HJ776-2015.
Hoạt động
Hoạt tính UltraNuclease bị ức chế đáng kể khi nồng độ SDS trên 0,1% hoặc EDTA
nồng độ trên 1mM.Surfactant Triton X-100, Tween 20 và Tween 80 không có tác dụng lên nuclease
tính chất khi nồng độ dưới 1,5%.
| Hoạt động | Vận hành tối ưu | Hoạt động hợp lệ |
| Nhiệt độ | 37oC | 0-45oC |
| pH | 8,0-9,2 | 6,0- 11,0 |
| Mg2+ | 1-2mM | 1- 15mM |
| DTT | 0- 100mM | > 100mM |
| 2-mercaptoetanol | 0- 100mM | > 100mM |
| Ion kim loại hóa trị một （Na+, K+, v.v.) | 0-20mM | 0-200mM |
| PO43- | 0- 10mM | 0- 100mM |
Cách sử dụng và liều lượng
• Loại bỏ axit nucleic ngoại sinh khỏi sản phẩm vắc xin, giảm nguy cơ độc tính tồn dư của axit nucleic và cải thiện độ an toàn của sản phẩm.
• Giảm độ nhớt của chất lỏng thức ăn do axit nucleic gây ra, rút ngắn thời gian xử lý và tăng sản lượng protein.
• Loại bỏ axit nucleic bao bọc hạt (vi rút, thể vùi, v.v.), có lợi cho
để giải phóng và tinh chế hạt.
| Loại thử nghiệm | Sản xuất chất đạm | Virus,Vắc-xin | Thuốc tế bào |
| Số lượng tế bào | Trọng lượng ướt 1g tế bào (được huyền phù lại với dung dịch đệm 10ml) | lên men 1L chất lỏng nổi trên bề mặt | văn hóa 1L |
| Liều lượng tối thiểu | 250U | 100U | 100U |
| Liều lượng khuyến nghị | 2500U | 25000U | 5000U |
• Xử lý nuclease có thể cải thiện độ phân giải và độ thu hồi của mẫu cho sắc ký cột, điện di và phân tích vết thấm.
• Trong liệu pháp gen, axit nucleic được loại bỏ để thu được các virus liên quan đến adeno đã được tinh chế.
