Multiplex Một bước RT-qPCR Premix
Sự miêu tả
Mã số: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix là một bộ PCR định lượng multiplex dựa trên RNA làm mẫu.Trong thí nghiệm, sao chép ngược và PCR định lượng được thực hiện trong cùng một ống phản ứng, đơn giản hóa thao tác thí nghiệm và giảm nguy cơ ô nhiễm.Thiết kế độc đáo của hỗn hợp đệm và enzyme có thể được sử dụng trong hệ thống đông khô một bước.Bộ sản phẩm sử dụng Reverse Transcriptase chịu nhiệt để tổng hợp hiệu quả cDNA chuỗi đầu tiên bằng cách sử dụng Taq DNA Polymerase khởi động nóng để khuếch đại định lượng.Nó chứa bộ đệm phản ứng được tối ưu hóa, hỗn hợp enzyme, v.v. và các yếu tố ức chế hiệu quả quá trình khuếch đại PCR không đặc hiệu, đồng thời nâng cao hiệu quả khuếch đại của nhiều phản ứng qPCR, cho phép khuếch đại định lượng huỳnh quang nhiều lần trong khi vẫn đảm bảo hiệu quả khuếch đại của mồi.
Các thành phần
| Tên |
| 1. Bộ đệm Lyo |
| 2. Hỗn hợp Lyo-Enzyme |
| 3. Chất bảo vệ Lyo |
Điều kiện vận chuyểnion
A: Chất đệm và chất bảo vệ Lyo: -25~-15oC, thời hạn sử dụng là 1 năm.
B: Hỗn hợp enzyme Lyo, 2-8oC, thời hạn sử dụng là 6 tháng.
Hướng dẫn vận hành
1. Hệ thống phản ứng (Lấy 25μL làm ví dụ)
| Các thành phần | Khối lượng (μL) | Nồng độ cuối cùng |
| Bộ đệm Lyo | 6 | 1* |
| Hỗn hợp Lyo-Enzyme | 1 | - |
| Lyo-Bảo Vệ | 8 | - |
| Hỗn hợp sơn lót (10μM) | 1 | 0,1- 1uM |
| Hỗn hợp thăm dò (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5uM |
| Mẫu RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Lên đến 25 | - |
2. Giao thức đạp xe được tối ưu hóa
1) Giao thức đạp xe tiêu chuẩn
| Giai đoạn phản ứng | Nhiệt độ | Thời gian | Xe đạp | |
| 1 | Phiên mã ngược | 50°Ca | 10 phút | 1 |
| 2 | Biến tính ban đầu | 95°C | 5 phút | 1 |
| 3 | Phản ứng khuếch đại | 95°C | 15 giây | 45 chu kỳ |
| 60°Cb | 30 giâyc |
2) Giao thức đạp xe nhanh
|
| Giai đoạn phản ứng | Nhiệt độ | Thời gian | Xe đạp |
| 1 | Phiên mã ngược | 50°Ca | 2 phút | 1 |
| 2 | Biến tính ban đầu | 95°C | 2 giây | 1 |
| 3 | Phản ứng khuếch đại | 95°C | 1 giây |
45 chu kỳ |
| 60°Cb | 13 giâyc |
Ghi chú:
a) Đảo ngược phiên mã: Nhiệt độ có thể chọn 42°C hoặc 50°C trong 10-15 phút.
b) Phản ứng khuếch đại: Nhiệt độ được điều chỉnh theo giá trị Tm của lớp sơn lót được thiết kế.
c)huỳnh quang tín hiệu sự mua lại: Vui lòng thiết lập quy trình thí nghiệm theo yêu cầu củahướng dẫn sử dụng nhạc cụ.
Thông tin kỹ thuật/Thông số kỹ thuật
| Bắt đầu nóng | Khởi động nóng tích hợp |
| Phương pháp phát hiện | Phát hiện đầu dò mồi |
| phương pháp PCR | RT-qPCR một bước |
| Loại mẫu | ARN |
Ghi chú
1. Sản phẩm này chỉ dành cho mục đích nghiên cứu.
2. Vui lòng mặc PPE cần thiết, chẳng hạn như áo khoác và găng tay phòng thí nghiệm, để đảm bảo sức khỏe và sự an toàn của bạn!
